9、结合试验，简述巴氏杆菌的分离鉴定要点。8 分
1）病料涂片或触片检查：美蓝或瑞氏染色，两极着染短杆菌；革兰氏阴性
2）分离培养：Mac不生长；血平板不溶血，形成灰白色露珠状针尖大小菌落
3）动物试验：病料悬液或培养物接种小鼠，小鼠短时间内死亡
10.简述猪瘟的微生物学诊断。
⑴直接荧光抗体染色：
①取扁桃体、脾脏做触片
②以荧光素标记的抗CSFV抗体检查CSFV抗原
⑵病毒分离：
①采集高热期的血液、淋巴结、脾和扁桃体，流产猪的脏器
②接种PK15细胞 ，24-72h后检查CSFV抗原
⑶病毒鉴定：区别强毒，疫苗弱毒感染抗体的ELISA试剂盒
⑷兔体免疫试验：取易感家兔测定体温后，接种送检病科，每天测定体温，7d后再接种兔化猪瘟弱毒并连续测温3d。
⑸如果兔体温升高不到1℃，则证明病科中存在CSFV
11.巴氏消毒法
①特点：用较低温度杀灭液体中的病原微生物或特定微生物，而仍保持物品中所需的不耐热成分不被破坏的消毒方法
②适用范围：半乳制品，酒类等消毒
③方法（1）低温维持巴氏消毒法LTH ：63~65℃，30min
（2）高温瞬时巴氏消毒法HTST：71~72℃，15~30s
（3）超高温巴氏消毒法UHT : 132℃,1~2s 迅速冷却至10℃
1.细菌群体生长繁殖可分为4个时期，简述各期特点。对实践有何参考意义。
（1）迟缓期：为菌体分裂做好准备，细胞体积变大；代谢活跃，胞内集聚大量的酶，中间代谢产物不分裂繁殖。
（2）对数期：细菌生长最迅速的阶段。
以恒定速度分裂，活菌数以几何级数增长；此期细菌形态、染色性、生理特性典型；对外界因素及药物较敏感；绝大多数是活细菌，生命力旺盛；一般可持续6-12h。
适应做形态染色、生化实验、药物敏感性试验等研究及保存菌种。
（3）稳定期：细菌的繁殖速度逐渐下降，死亡数逐渐增多；易出现形态特征生理特性的变异；芽孢、外毒素、抗生素多在此期产生。
不进行形态鉴定
（4）衰退期：繁殖速度越来越慢，死亡数增多，活菌数减少；死亡数超过繁殖数，但总菌数并不下降；形态变化显著，细菌变长、肿胀、扭曲、染色不典型。
不同陈旧培养进行细菌的分离鉴定
2. 细菌生长繁殖的条件
营养：培养基；酸碱度：PH7.2-7.6；温度：病原菌一般在37℃；气体：O2、CO2；渗透压：等渗环境
3.简述蒸汽灭菌法的特点、适用范围、方法和注意事项？【17问答，8分】
特点：利用高压蒸汽灭菌进行灭菌的方法。应用范围最广、最为有效的方法。
适用范围：耐高温、不怕潮湿的物品。如培养基、溶液、器械器皿、实验服、实验动物尸体等。
方法：在103.4kPa的压力下，121.3℃下维持15-20min，即可达到完全灭菌的目的
注意事项：灭菌的物品不宜过大、过紧，物品不能超过灭菌箱的85%；布类物品应放置在金属和陶瓷物品之上；盛装物品的容器应有孔，无孔时，应将盖子打开；密闭前，应将冷空气排空；随时观察压力及温度情况；注意安全操作，每次灭菌前，应检查灭菌器；灭菌完毕后减压不要过猛，压力表回归，“0”位后才可打开盖或门；被灭菌物品应待干燥后才能取出各用。
4.试述动物致病性大肠杆菌的分离与鉴定过程？（27.关于仔猪黄痢实验室诊断）
采集病料
麦康凯培养基或血平板上划线分离培养
挑取可疑菌落纯培养
做初步生化鉴定，以确定分离株是否为大肠杆菌
血清型鉴定O、K、H
在此基础上，通过对毒力因子的检测便可确定其属于何类致病性大肠杆菌
4.菌的分离培养过程
1）标本采集
2）分离培养
3）扩增
4）染色，观察形态结构
5）生化反应鉴定
6）血清学试验
7）药物敏感试验
5.什么是感染性核酸（传染性核酸），有何特点？
概念：在些病毒去除其囊膜和衣壳，裸露的DNA 或RNA 注入易感细胞内也能引起感染，并产生完整的病毒颗粒。这样的核酸称为传染性核酸
特征：
（1）不分节段，其本身能作为mRNA
（2）或者能利用宿主细胞的RNA聚合酶转录病毒的mRNA
（3）病毒核酸具有传染性这一事实证明它贮藏病毒全部遗传信息
6. 列举5种常见的畜禽免疫控制性病原体及名称及其所致疾病名，并分别说明病原的主要生物学特征？
（1）马立克氏病毒：疱疹病毒甲亚科，球状；线状双股DNA，20面体对称核衣壳，有囊膜。
（2）传染性法氏囊病毒：双RNA病毒科/禽双RNA病毒属，双股双节段RNA；20面体对称核衣壳，无囊膜。
（3）传染性贫血病毒：圆环病毒科，球状；单股环状单链DNA；20面体对称核衣壳。
（4）禽白血病病毒：反录病毒科，球状；单股正链RNA，二倍体；20面体对称核衣壳，有囊膜；具有反转录酶。
（5）网状内皮增生病病毒：反转录病毒科，近球形，有囊膜，单股RNA病毒，螺旋对称核衣壳。 本章未完，请点击下一页继续阅读！ 第1页/共3页
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